Tumorstammzellmarker beim Ovarial- und Mammakarzinom: Bedeutung der ALDH Aktivität und der CDCP1 Expression

Abstract

In dieser Arbeit wurde die Bedeutung der ALDH Aktivität und CDCP1 Expression für Tumorzelllinien des Mammakarzinoms, des Lungenadenokarzinoms, und des Ovarialkarzinoms sowie für primäres ovariales Tumorgewebe untersucht. Beiden Markern ist eine Assoziation mit erhöhtem Metastasierungspotential sowie mit invasivem Wachstum und Resistenz gegenüber Chemotherapie gemein. Ziel war herauszufinden ob jeweils eine Assoziation zu Tumorstammzellpotential besteht. Eine Tumorstammzellassoziation ergab sich für beide Marker bei Leukämie und für die ALDH auch bei weiteren soliden humanen Tumoren, wie dem Mammakarzinom. Jedoch ist die funktionelle Rolle der ALDH nicht für jedes Gewebe gleichbedeutend oder sie ist noch unklar; aktuelle Daten zum Ovarialkarzinom sind widersprüchlich. Zunächst wurden sämtliche Zelllinien im Aldefluor-Assay, bzw. durch Verwendung des primären Antikörpers CUB2 auf ihre Markerexpression hin analysiert. Anschließ-end wurde das Tumorstammzellpotential der positiv markierten Zellpopulationen im Sphärenassay untersucht. Beim Ovarialkarzinom wurden zusätzlich Zellzyklusanaly-sen und Untersuchungen der Differenzierungskapazität durchgeführt. Es ergab sich, dass CDCP1 sowohl in der Durchflusszytometrie als auch im Sphä-renassay nicht geeignet ist umschriebene Populationen zu isolieren. Dagegen zeigte sich beim Mammakarzinom bei der ALDH positiven Population der Zelllinie SKBR-3 ein stärkeres Potential gegenüber der negativen Population Sphären zu bilden. Es konnte gezeigt werden, dass auch beim Ovarialkarzinom Sphärenbildung möglich ist und dass die Fähigkeit der Ovarosphärenbildung in Zusammenhang mit der ALDH Aktivität steht. Auch das Proliferationspotential der ovarialen ALDH positiven Popula-tion, im Fall von der Zelllinie OVCAR-3, unterscheidet sich signifikant von dem der ALDH negativen Population. Allerdings zeigte sich hier auch bei der ALDH negativen Population eine Differenzierung in Richtung ALDH positiver Zellen. Die Daten dieser Arbeit zeigen, dass CDCP1 nicht als Tumorstammzelmarker benut-zt werden kann. Anders verhält es sich bei der ALDH, deren erhöhte Aktivität, bei verschiedenen humanen Tumoren, wie dem Mammakarzinom mit Stammzellpotential assoziiert ist, was durch diese Arbeit belegt wurde. Der Sphären-Assay konnte für die ALDH positive Tumorzellpopulation des Ovarialkarzioms etabliert werden und dieser Population somit Stammzellpotential zugesprochen werden. Untersuchungen der Proliferationskapazität widersprechen dem Tumorstammzellcharakter der ALDH positiven Population beim Ovarialkarzinom jedoch. Definitiv kennzeichnet dieser funktionelle Marker Zellen mit erhöhter proliferativer Kapazität.