Neue Komponenten zur Erforschung der HLA-B18-restringierten CD8+ T-Zell-Antwort gegen das Epstein-Barr-Virus

Abstract

EBV führt oft zum Tod von immunsupprimierten Transplantationspatienten oder HIV-infizierten Personen und ist mit mehreren Tumorerkrankungen assoziiert. Der Einsatz einer neuen Therapie, der adoptive Transfer von zytotoxischen T-Zellen, ist unter anderem abhängig von der individuellen Epitopmuster-modulierenden HLA-Molekül-Kombination. Das Arbeitsziel ist eine Grundlage für die Untersuchung der HLA-B18-restringierten CD8+ T-Zell-Antwort zu schaffen. Die Analysen umfassen Peptide aus 18 EBV-Antigenen. Im ELISPOT, darunter im neu etablierten Pool-single peptide-ELISPOT, wurden IFN gamma-Antworten gegen multiple Epitopkandidaten, unter anderem gegen das neue Epitop SESGQFHAF, beobachtet. Um die HLA-B18-restringierte CD8+ T-Zell-Antwort zu studieren, wurden geeignete Komponenten, die transfektante Zelllinie K562-B18 und das HLA-B18-Tetramer, generiert. Das dominante Epitop SELEIKRY und der Epitopkandidat NEIHVYNDY liegen in funktionellen Proteindomänen. Das Epitop SELEIKRY ruft ex vivo eine polyfunktionale T-Zell-Antwort hervor. Epitop-spezifische T-Zellen wurden mit dem HLA-B18-SELEIKRY-Tetramer detektiert. Der modifizierte Vital-Assay bestätigte die Zytotoxizität von SELEIKRY- und SESGQFHAF-spezifischen CD8+ T-Zellen. Die durchgeführten Untersuchungen können als Grundlage bei weiterer Erforschung der HLA-B18-restringierten CD8+ T-Zell-Antwort helfen.

EBV is frequently cause of death of immunosuppressed transplant patients or HIV-infected persons and is associated with several tumor diseases. The use of a new therapy, the adoptive transfer of cytotoxic T cells, depends inter alia from the epitope-modulating HLA molecule combination. The aim of the work is to provide a basis for the investigation of the HLA-B18 restricted CD8+ T cell response. Peptides from 18 EBV antigens were investigated in the analysis. In the ELISPOT assay, thereunder in the newly established pool-single peptide-ELISPOT, IFN gamma-responses to multiple epitope candidates, among others against the new epitope SESGQFHAF, were observed. Appropriate components, the transfectant cell line K562-B18 and HLA-B18-tetramer, were generated to study HLA-B18 restricted CD8+ T cell response. The dominant epitope SELEIKRY and the epitope candidate NEIHVYNDY are located in functional protein domains. The epitope SELEIKRY elicits ex vivo a polyfunctional T cell response. Epitope specific T cells were detected with the HLA-B18-SELEKRY-tetramer. The modified Vital Assay confirmed the cytotoxicity of SELEIKRY- and SESGQFHAF-specific CD8+ T cells. The performed investigations can assist as basis in further research of the HLA-B18 restricted CD8+ T cell response.