Immobilisierung von Enzymen auf Polyestervliesen und deren Anwendungen

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dc.contributor.advisor Bisswanger, Hans de_DE
dc.contributor.author Nouaimi-Bachmann, Meriem de_DE
dc.date.accessioned 2003-07-09 de_DE
dc.date.accessioned 2014-03-18T10:11:26Z
dc.date.available 2003-07-09 de_DE
dc.date.available 2014-03-18T10:11:26Z
dc.date.issued 2003 de_DE
dc.identifier.other 107330342 de_DE
dc.identifier.uri http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bsz:21-opus-8338 de_DE
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10900/48481
dc.description.abstract Am Beispiel des Papierspaltverfahrens wird die praktische Anwendung von auf Polyestervlies immobilisierten Proteasen untersucht. Da die relativ unpolare Trägeroberfläche des Vlieses die Langzeitstabilität des Enzymes (Trypsin) verschlechtern kann, werden Spacer-Moleküle eingesetzt, um das Trypsin von der Vliesoberfläche abzuschirmen. Es kommen der relativ hydrophile Spacer Polyethylenglykol-Diamin (PEG-Diamin), ein Dextran-Spacer und ein Protein-Spacer (BSA) zum Einsatz. Bei den ersten Typen handelt es sich jeweils um lineare Ketten. Der Proteinspacer dagegen stellt ein sehr großes raumerfüllendes Molekül dar, das selbst durch das über ihn immobilisierte Enzym angegriffen werden könnte. Für die einzelnen Spacer wurden jeweils geeignete Synthesewege geprüft. Die Stabilität des über die verschiedenen Spacer immobilisierten Trypsins wurde in Hinblick auf den pH-Wert, die Temperatur, unpolare Lösungsmittel und wiederholten Einsatz untersucht. Durch NMR-Spektroskopie und Scanning Electron Microscope (SEM)-Aufnahmen wurde verfolgt, in wie weit die einzelnen Syntheseschritte, insbesondere die partielle Hydrolyse, Auswirkungen auf die Polymerstruktur des eingesetzten Polyester-Vlieses zeigen. Durch einen geeigneten Aktivitätstest wurde verfolgt, in wie weit das immobilisierte Trypsin für den Abbau von Gelatine herangezogen werden kann. Dazu wurde der Ninhydrintest auf die Untersuchung von Gelatine-Abbauprodukten als qualitative Methode angepasst. Die Gelatine-Abbauprodukte wurden durch chromatographische Methoden untersucht. Dazu wurden sowohl die Size-Exclusion-Chromatographie (SEC) als auch die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) herangezogen. Durch Vergleiche von unverdauter und mit immobilisiertem Trypsin behandelter Gelatine lassen sich qualitative Aussagen über den Abbauprozeß treffen. de_DE
dc.description.abstract The immobilization of trypsin directly on polyester fleece FO 2413 as well as via PEG-diamine, aldehyde dextran, amino dextran and bovine serum albumine (BSA) spacers was investigated. It is well established that longer spacers are required for efficient immobilization of biospecific molecules to solid support materials. These minimize steric hinderance and environmental effects imposed by the surface properties of the matrices. The hydrophobic surface of the polyester fleece causes inactivation of the immobilized enzyme. Therefore, the above-mentioned spacers were employed not only to achieve a high amount of bound trypsin but also to immobilize trypsin in its active conformation. The trypsin activity was tested with the N-benzoyl-DL-arginine-p-nitroanilide hydrochlorid (BAPNA) substrate as well as with the azocasein substrate, whereas the amount of fixed trypsin was determined by BCA method. To characterize the properties of the different linked trypsin molecules, the thermal stability, pH stability and the behaviour in ethanol/water mixtures was investigated. Due to the highest activity values obtained with the BSA spacer, this system was characterized more thoroughly by testing the activity behaviour after repetitive use and various storage conditions. Immobilized trypsin shows a high thermal and pH stability. Furthermore it can be stored for several months without loosing its activity. en
dc.language.iso de_DE de_DE
dc.publisher Universität Tübingen de_DE
dc.rights ubt-podok de_DE
dc.rights.uri http://tobias-lib.uni-tuebingen.de/doku/lic_mit_pod.php?la=de de_DE
dc.rights.uri http://tobias-lib.uni-tuebingen.de/doku/lic_mit_pod.php?la=en en
dc.subject.classification Polyethylenterephthalate , Vliesstoff , Trypsin , Immobilisiertes Enzym , Stabilität de_DE
dc.subject.ddc 540 de_DE
dc.subject.other fleece , BSA , trypsin , enzyme immobilization , stability en
dc.title Immobilisierung von Enzymen auf Polyestervliesen und deren Anwendungen de_DE
dc.title Immobilization of Enzymes on Polyester Fleece and its Applications en
dc.type Dissertation de_DE
dcterms.dateAccepted 2003-06-13 de_DE
utue.publikation.fachbereich Sonstige - Chemie und Pharmazie de_DE
utue.publikation.fakultaet 7 Mathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultät de_DE
dcterms.DCMIType Text de_DE
utue.publikation.typ doctoralThesis de_DE
utue.opus.id 833 de_DE
thesis.grantor 14 Fakultät für Chemie und Pharmazie de_DE

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