Nachweis von eisenmarkierten hämatopoietischen Vorläuferzellen im Agarphantom mittels hochauflösender MR-Tomographie

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dc.contributor.advisor Wiskirchen, J. (PD Dr. med.) de_DE
dc.contributor.author Kramberg, Sebastian de_DE
dc.date.accessioned 2011-03-09 de_DE
dc.date.accessioned 2014-03-18T09:44:04Z
dc.date.available 2011-03-09 de_DE
dc.date.available 2014-03-18T09:44:04Z
dc.date.issued 2011 de_DE
dc.identifier.other 338466061 de_DE
dc.identifier.uri http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bsz:21-opus-54740 de_DE
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10900/45803
dc.description.abstract Ziele: Untersuchung und Optimierung der Eisenmarkierung von hämatopoietischen Vorläuferzellen hinsichtlich klinischer Anforderungen beim Monitoring zellulärer Therapien. Material und Methoden: Als Stammzellmodell dienten CD34+ KG-1A-Suspensionszellen. Diese wurden zu unterschiedlichen Zeit- und Konzentrationsbedingungen mit Ferucarbotran (Resovist®)markiert (ohne als auch unter zusätzlicher Verwendung eines liposomalen (DOSPER) bzw. nichtliposomalen Transfektionsagens (JetPEI)). Der Eisengehalt pro Zelle wurde photometrisch bestimmt. Die MR-Untersuchungen erfolgten in Agarphantomen am Hochfeldtomographen (TimTrio [3.0T]). Die Verteilung des Kontrastmittels an bzw. in der Zelle wurde elektronen-mikroskopisch untersucht. Zur Bestimmung der Zellvitalität wurden Proliferationskinetiken durchgeführt und die Apoptoserate durchflußzytometrisch bestimmt. Ergebnisse: Die Fe-Aufnahme der Zellen ist abhängig von der Fe-Konzentration im Medium sowie der Inkubationszeit. Die maximale Eisenaufnahme beträgt ca. 100 pg/Zelle. Unter zusätzlicher Verwendung von Transfektionsagenzien (JetPEI und DOSPER) lässt sich - bei gleicher kernspintomographischer Signalauslöschung - die Eisenmenge im Medium um mindestens das 8fache und die Inkubationszeit um mindestens das 12fache reduzieren. Proliferierende Zellen lassen sich noch mindestens 10 Tage nach erfolgter Eisenmarkierung kernspintomographisch nachweisen. Schlußfolgerungen: Hämatopoietische Vorläuferzellen lassen sich ohne Einschränkung der Proliferationsfähigkeit und Vitalität effektiv mit auf Ferrit basierenden Kontrastmitteln beladen und kernspintomographisch detektieren. Durch Verwendung von Transfektionsagentien lässt sich die benötigte Eisenmenge und die Inkubationszeit signifikant verringern, was beim klinischen Monitoring von Therapien mit hämatopoietischen Stammzellen von Vorteil sein könnte. de_DE
dc.description.abstract Goals: Analysis and optimization of iron-labelling of hematopoietic progenitor cells regarding clinical recommendations during monitoring of cellular therapies. Materials and methods: CD34+ KG-1A-suspension cells were used as a stem cell model. These cells were labelled with ferucarbotran (Resovist) applying different concentrations of resovist and different time periods (with and without additional use of liposomal (DOSPER) and non-liposomal transfection agents (JetPEI)). The cellular iron load was measured via photometry. High-field MR-scans (Tim trio [3.0T]) were performed with agar phantoms. Cellular iron distribution of the contrast agent was evaluated via electron microscopy. Cellular vitality was examined with proliferation kinetics and the rate of apoptosis was measured with FACS-Analysis. Results: Cellular iron uptake is dependent upon Fe-concentration in media and incubation time. The max. iron uptake percells is ca. 100 pg/cell. The additional use of transfection agents (JetPEI and DOSPER) allows to reduce the amount of iron in the media by the 8fold and incubation time can be reduced by the 12fold, preserving the same signal extinction in NMR. Proliferating cells can be detected by NMR at least 10 days after iron labelling. Conclusions: Hematopoietic progenitor cells can be effectively labelled with ferrite-based contrast media and then be detected via NMR without impact on proliferation or vitality. With additional use of transfection agents the required amount of iron and incubation time can be minimized significantly, which could be an advantage in the monitoring of therapies with hematopoietic stem cells. en
dc.language.iso de_DE de_DE
dc.publisher Universität Tübingen de_DE
dc.rights ubt-podok de_DE
dc.rights.uri http://tobias-lib.uni-tuebingen.de/doku/lic_mit_pod.php?la=de de_DE
dc.rights.uri http://tobias-lib.uni-tuebingen.de/doku/lic_mit_pod.php?la=en en
dc.subject.classification Molekulare Bildgebung , NMR-Tomographie , Eisenoxide de_DE
dc.subject.ddc 610 de_DE
dc.subject.other Transfektionsagenzien , SPIO , CD34+ Hämatopoietische Vorläuferzellen , Therapiemonitoring de_DE
dc.subject.other Molecular imaging , MR-tomography , Iron oxides , CD34+ hematopoietic progenitor cells en
dc.title Nachweis von eisenmarkierten hämatopoietischen Vorläuferzellen im Agarphantom mittels hochauflösender MR-Tomographie de_DE
dc.title Detection of iron-labelled hematopoietic progenitor cells in agar phantoms via high-resolution MR-Tomography en
dc.type Dissertation de_DE
dcterms.dateAccepted 2008-05-15 de_DE
utue.publikation.fachbereich Medizin de_DE
utue.publikation.fakultaet 4 Medizinische Fakultät de_DE
dcterms.DCMIType Text de_DE
utue.publikation.typ doctoralThesis de_DE
utue.opus.id 5474 de_DE
thesis.grantor 4 Medizinische Fakultät de_DE

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