Die Proteinexpression des Wilms-Tumor-Gens 1 (WT1) in akuten myeloischen Leukämiezelllinien und akuten Leukämien des Kindesalters

Abstract

In dieser Arbeit konnte erstmalig gezeigt werden, dass das WT1-Protein durchflusszytometrisch detektiert werden kann. In kindlichen akuten Leukämien unterscheidet sich die WT1-Proteinexpression erheblich von der Zahl der WT1-Transkripte und ist zu niedrig, um in durchflusszytometrischen MRD-Studien verwendet werden zu können. In den Leukämiezelllinien HL-60 und K562 wird das WT1-Protein stark exprimiert. In langsam proliferierenden HL-60 und K562 Zellen jedoch ist das WT1-Proteinexpressionsniveau in allen Zellzyklusphasen erniedrigt. Zusätzlich ist die WT1-Proteinexpression in der G0/G1-Phase im Vergleich zur S- und G2/M-Phase am niedrigsten. Langsam proliferierende Tumor-Stammzellen, die für eine MRD und spätere Rezidive verantwortlich sein könnten, könnten daher eine vergleichbar geringe WT1-Proteinexpression aufweisen und von gegen WT1 gerichteten Immuntherapien nicht erreicht werden.

WT1 protein can be detected by flow cytometry, as could be shown for the first time in this work. In childhood acute leukemia WT1 protein levels differ considerably from WT1 transcript levels and are too low to permit MRD studies by flow cytometry. WT1 protein is highly expressed in leukemic cell lines HL-60 and K562. However, in slowly proliferating HL-60 and K562 cells the WT1 protein expression is reduced in all cell cycle phases and in G0/G1 phase lower than in S and G2/M phase. Slowly proliferating tumor stem cells, which might be responsible for MRD and later relapses, could show a comparably low WT1 protein expression and may not sufficiently be affected by immunotherapeutic strategies targeting WT1.