Expression und Sekretion heparinbindender Wachstumsfaktoren bei Zellinien solider pädiatrischer Tumoren

Abstract

Heparinbindende Wachstumsfaktoren spielen eine wichtige Rolle im Wachstum und bei der Neovaskularisierung solider Tumoren. In der vorliegenden Arbeit wurde die Expression und Sekretion der Wachstumsfaktoren Pleiotrophin (PTN), Midkine (MK), Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) und basic Fibroblast Growth Factor (bFGF) bei Zellinien von Neuroblastomen, Hepatoblastomen und Nephroblastomen auf mRNA- und Protein-Ebene untersucht. Darüberhinaus wurde geprüft, ob die Zytokine TNFa, IL-1b und IFNg einen regulierenden Einfluß auf die Expression und Sekretion dieser Faktoren haben. Der Wachstumsfaktor Pleiotrophin wird nur von den Neuroblastomzellinien (IMR-32, IMR-5.75, Kelly, SK-N-SH, Wac2) exprimiert, nicht von den Zellinien G401 (Wilms´Tumor), HepG2 und C3A (Hepatoblastome). In seiner trunkierten Form wird der Faktor Midkine von allen untersuchten malignen Zellinien exprimiert. Der Faktor bFGF wird nur von den Neuroblastomzellinien und der Wilms´Tumorzellinie G401 exprimiert. Die beiden Hepatoblastomzellinien HepG2 und C3A exprimieren diesen Faktor nicht. Die Neuroblastomzellinien sezernieren bFGF nur sehr schwach (Konzentrationen von 0,94 pg/ml bis 3,6 pg/ml). Die Zellinie G401 sezerniert mit 59 pg/ml hingegen eine größere Menge von bFGF, wohingegen die mRNA Expression gering bleibt. Der Faktor VEGF wird von allen untersuchten Zellinien exprimiert und sezerniert. Die höchsten Werte erreichen die Hepatoblastomzellinien C3A und HepG2 (2661 pg/ml und 2185 pg/ml) und die Zellinie Kelly (2515 pg/ml). Die Behandlung der Tumorzellinien mit den Zytokinen TNFa, IL-1b und IFNg resultiert nicht in einer signifikanten Veränderung der mRNA-Expression oder der Sekretion der Wachstumsfaktoren. Heparinbindende Wachstumsfaktoren werden von Zellinien maligner solider pädiatrischer Tumoren auf mRNA- und Protein-Ebene exprimiert. Durch Hemmung und Antagonisierung der Wachstumsfaktoren eröffnet sich vielleicht ein neuer Therapieansatz.

Heparinbinding growth factors play an important part for growth and neovascularization of solid tumors. In the present thesis the expression and secretion of the growth factors Pleiotrophin (PTN), Midkine (MK), Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) and basic Fibroblast Growth Factor (bFGF) in the cell lines of neuroblastoma, hepatoblastoma and nephroblastoma was tested within mRNA- and protein-level. Furthermore it was tested if the cytokines TNFa, IL-1b and IFNg have a regulating influence over the expression and secretion of the factors mentioned above. The growth factor Pleiotrophin is only expressed in the neuroblastoma cell lines (IMR-32, IMR-5.75, Kelly, SK-N-SH, Wac2), but not in the cell lines G401 (Wilms´tumor), HepG2 and C3A (hepatoblastoma). In its truncated form Midkine is expressed in all malignant cell lines. The factor bFGF is only expressed in the neuroblastoma cell lines and in the cell line of the Wilms´tumor G401.The hepatoblastoma cell lines HepG2 and C3A don´t express this factor. The neuroblastoma cell lines secrete bFGF only very weakly (concentrations: 0.94 pg/ml to 3.6 pg/ml). The cell line G401 secretes a higher amount of bFGF (59 pg/ml), whereas the mRNA-expression stays low. The factor VEGF is expressed and secrected in all investigated cell lines. The hepatoblastoma cell lines C3A and HepG2 (2661 pg/ml and 2185 pg/ml) and the cell line Kelly (2515 pg/ml) reach the highest amounts. The treatment of the cell lines with the cytokines TNFa, IL-1b, and IFNg doesn´t result in a signficant change of the mRNA-expression or the secretion of the growth factors. Heparinbinding growth factors are expressed by the cell lines of malignant solid pediatric tumors on mRNA- and protein level. By hindering and antagonizing the growth factors a new way in therapy possibly could be found.